PCR：即合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)，利(li)用DNA在(zai)體外95℃時解旋（變性），55℃時引物與單鏈按(an)堿基互(hu)補配對的原則結合（退火），再調(diao)溫度至72℃左右(you)，DNA聚(ju)合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方(fang)向(xiang)合成互補鏈（延伸）。

PCR儀實際就(jiu)是一個(ge)溫控設備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地(di)進行(xing)溫度控制。

根據DNA擴增的(de)(de)目的(de)(de)和檢(jian)測的(de)(de)標準可(ke)以將PCR儀分為：普通PCR儀，梯度PCR儀，原位PCR，實時熒光定量PCR儀等幾(ji)類(lei)

普通PCR儀：

一般把一次PCR擴增只能運行一個特(te)定退火溫度的PCR儀(yi)，稱之為(wei)普通PCR儀，也就(jiu)是傳統的(de)PCR儀。如果(guo)要(yao)用它做不同的(de)退火(huo)溫度則需要(yao)多(duo)次運行(xing)。

   普(pu)通PCR儀主要應用于科研、教(jiao)學(xue)、臨床醫學(xue)、檢驗、檢疫等。

如:啟步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型

更(geng)多詳(xiang)情: 上海啟步生物(wu)科(ke)技(ji)有(you)限公司(si)

梯度PCR儀：

一次性(xing)PCR擴增可(ke)以設置一系列不同的退(tui)火溫度條件（通常12種溫度梯(ti)(ti)度）的(de)稱之(zhi)為梯(ti)(ti)度PCR儀。不同的DNA片段其的退(tui)火(huo)溫度(du)(du)不同，通(tong)過設置一系列的梯度(du)(du)退(tui)火(huo)溫度(du)(du)進行擴增，從而(er)一次性(xing)PCR擴增(zeng)就可以篩選出表(biao)達量高的退火溫度進行有效(xiao)的擴增(zeng)。

    梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度(du)的擴增，這(zhe)樣既節約(yue)時(shi)間，也(ye)節約(yue)成本。在不(bu)設(she)置梯(ti)度(du)的情(qing)況下亦可當做普通的PCR用。梯度PCR儀多應用于科(ke)研、教學機構,檢驗、檢疫(yi)等。

如:啟步BSW-2T,BSW-3T,BSW-6T-I/II ,ABI 9700,ABI Veriti, Bio-Rad T100 PCR儀

更(geng)多詳(xiang)情: 上(shang)海啟步生物科(ke)技(ji)有限(xian)公司

原位PCR儀：

PCR是提(ti)取細胞或(huo)組織(zhi)中的DNA進行基因擴增反(fan)應(ying)，而原位PCR是保持細胞(bao)或(huo)組(zu)織的完(wan)整性，使PCR反(fan)應體系滲透到(dao)組織(zhi)和細胞(bao)中，在細胞(bao)的靶DNA所在的(de)位置上(shang)進行基因擴增(zeng)。不但可(ke)以檢測到(dao)靶DNA，而(er)且(qie)還可以了解靶DNA存在(zai)于(yu)何種(zhong)細胞中，更有利于(yu)探(tan)討靶DNA與細胞之間(jian)的關(guan)系。

    原位PCR儀,主要(yao)應用于：（1）檢(jian)測(ce)外源性基因(yin)片(pian)段，提高檢(jian)出率(lv)，集中(zhong)在病毒感染(ran)的檢(jian)查上，如(ru)HIV、HPV、HBV、CMV等；（2）觀(guan)察病原體(ti)在體(ti)內分布(bu)規律（3）內源(yuan)性基(ji)因(yin)片段，如人體(ti)的(de)單基(ji)因(yin)病、重組基(ji)因(yin)、易位的(de)染色體(ti)、Ig的mRNA片段(duan)、癌基因片段(duan)等。（4）檢測導入基因(yin)；（5） 遺傳病(bing)基因檢測如β－地中海貧(pin)血。 

實時熒光定量(liang)PCR儀：

在普(pu)通PCR儀設(she)計基礎上增加熒光(guang)(guang)信(xin)號采集系(xi)統和計算機(ji)分(fen)析處理系(xi)統，形成了具有熒光(guang)(guang)定(ding)量功能(neng)的PCR儀器。其PCR擴增原理(li)和普通PCR擴增(zeng)原理相同，在PCR擴增(zeng)時(shi)(shi)加入(ru)的(de)引物(wu)是利用(yong)同位素、熒(ying)光(guang)素等進行標(biao)記，使用(yong)引物(wu)和熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)同時(shi)(shi)與模板特異性結合(he)擴增(zeng)。擴增(zeng)的(de)結果(guo)通(tong)過熒(ying)光(guang)信號采(cai)集系統(tong)實時(shi)(shi)采(cai)集信號連(lian)接(jie)輸(shu)送到計算機分析處理系統(tong)，得出(chu)量(liang)化的(de)實時(shi)(shi)結果(guo)輸(shu)出(chu)。

   熒光定(ding)量PCR儀有單(dan)通(tong)(tong)道(dao)，雙通(tong)(tong)道(dao)和多(duo)通(tong)(tong)道(dao)之分(fen)。當(dang)只(zhi)用(yong)一種熒(ying)光探針標記(ji)的(de)時候(hou)(hou)，選(xuan)用(yong)單(dan)通(tong)(tong)道(dao)；有多(duo)種熒(ying)光標記(ji)的(de)時候(hou)(hou)使用(yong)多(duo)通(tong)(tong)道(dao)。單(dan)通(tong)(tong)道(dao)也(ye)可以檢測(ce)多(duo)熒(ying)光的(de)標記(ji)和目的(de)基因表達產物(wu)，因為一次只(zhi)能(neng)(neng)檢測(ce)一種目的(de)基因的(de)擴增量，需多(duo)次擴增才能(neng)(neng)檢測(ce)完(wan)不(bu)同的(de)目的(de)基因片段的(de)量。多(duo)通(tong)(tong)道(dao)利于做多(duo)重PCR，實(shi)現一次(ci)檢測多種目(mu)的基因(yin)的功能。

   熒(ying)光定量PCR儀主要應(ying)用(yong)于(yu)臨(lin)床醫(yi)學檢測、生物醫(yi)藥(yao)研發、食品行業、科研院校(xiao)等(deng)。熒光定(ding)量檢測技術(shu)在(zai)臨(lin)床診(zhen)斷方(fang)面(mian)很多，主要集(ji)中在(zai)各種(zhong)病原(yuan)體(ti)引起疾(ji)病的臨(lin)床診(zhen)斷，如肝炎類疾(ji)病、性病、與優生優育相關(guan)的疾(ji)病以及肺(fei)結核等(deng)等(deng)。

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