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奧林巴斯顯微鏡光路照明系統的調整有4項內容

更新時間:2019-11-18      瀏覽次數:2617

(1) 照明光源燈室(shi)在顯微外的初步調整(zheng)
① 首先將燈室的外殼打開,壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中,安裝時避免手指直接接觸燈泡(可用柔軟的布或紙隔住),以免燈泡上留有指紋等臟物,影響燈泡的使用壽命。
② 把燈室擺在桌面上,接通電源后,用的螺絲刀調節燈的調焦旋鈕孔(標有"←→"),使燈絲投影在1-2m外的墻上,將燈絲成像調至清晰;然后調節燈的高低位置調節絲孔(標有"──"),使燈絲位置高低適當;再調節燈的左右位置調節螺絲孔(標有"──"),使燈絲左右位置合適。 

2) 光源(yuan)發光體(燈絲)在奧林巴斯顯微鏡內位置的檢(jian)驗(yan)和校正:
目的是為了把發光體的像端端正正地調入物鏡的視域范圍內,從光源的角度去確保奧林巴斯顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明,這是調整庫勒照明系統的前提條件。需要的基本工具:對中望遠鏡購置奧林巴斯顯微鏡時已配備。
① 拔掉燈庫內的毛玻璃套筒,把燈室裝回奧林巴斯顯微鏡上;

② 選用10×物(wu)鏡(jing),開(kai)亮光源(yuan)程(cheng)序(xu)找樣品并調(diao)焦(jiao)清(qing)晰(xi),再(zai)換用40×物(wu)鏡(jing)把樣品調(diao)焦(jiao)清(qing) 晰(xi)(40×物(wu)鏡(jing)可以看清(qing)燈絲的全貌);

③ 把聚光鏡的孔徑光闌和視場光闌均開到大;
④ 拔掉其中一個目鏡,換上對中望遠鏡,抓住白色部分,另一手伸縮黑色接目鏡,就可在視野中看到燈絲像;
⑤ 如燈絲位置不合適,調"──"孔,把燈絲像沿水平方向調好,調"──"孔,把絲像沿垂直方向調好,直至將燈絲像調至剛好充滿物鏡孔徑的光圓像;
⑥ 調整完畢后,將毛玻璃套筒插回原位,拔掉對中望遠鏡,換回目鏡作下一步調整。以上所述照明光源燈室在奧林巴斯顯微鏡外的調整和光源發光體在奧林巴斯顯微鏡內位置的校驗,只需在奧林巴斯顯微鏡初次安裝調試及更換燈泡時進行,平時使用奧林巴斯顯微鏡時不能隨意亂調亂動。萬一調亂時,可按上述步驟調回原狀。

(3) 庫勒照明(Kohler)系統的正確調整:

 奧(ao)林巴(ba)斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)(de)正確調(diao)(diao)(diao)試,主要(yao)工作(zuo)之(zhi)一是(shi)照明光路系(xi)統的(de)(de)調(diao)(diao)(diao)整(zheng),而其(qi)中的(de)(de)關鍵是(shi)庫(ku)勒照明系(xi)統的(de)(de)調(diao)(diao)(diao)整(zheng)。對于每一位使(shi)用奧(ao)林巴(ba)斯(si)顯(xian)微(wei)鏡的(de)(de)人員(yuan),特別是(shi)作(zuo)顯(xian)微(wei)照像的(de)(de)人員(yuan)來說,應該對庫(ku)勒照明系(xi)統的(de)(de)原理(li)及其(qi)調(diao)(diao)(diao)整(zheng)步驟有一定的(de)(de)了解和掌握(wo),才能(neng)充分(fen)發揮奧(ao)林巴(ba)斯(si)顯(xian)微(wei)鏡應有的(de)(de)功能(neng),拍出來的(de)(de)照片才能(neng)在(zai)效(xiao)果上比(bi)較(jiao)一致(zhi)而又完善。

庫勒照(zhao)明(ming)(ming)系統的(de)原(yuan)理簡單來說(shuo)就(jiu)(jiu)是(shi):光(guang)(guang)(guang)源(yuan)(yuan)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)體上任意一(yi)點(dian)發(fa)(fa)出的(de)光(guang)(guang)(guang),可以照(zhao)明(ming)(ming)奧林(lin)(lin)巴斯顯微鏡的(de)視域范(fan)圍,而(er)光(guang)(guang)(guang)源(yuan)(yuan)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)體上每一(yi)點(dian)所發(fa)(fa)出的(de)光(guang)(guang)(guang)匯集起來,在奧林(lin)(lin)巴斯顯微鏡的(de)視域中就(jiu)(jiu)實現了非常充分而(er)又均勻(yun)的(de)照(zhao)明(ming)(ming)。

調整庫勒照明系統的目的,是為了(le)使所觀察(cha)的視域能獲得均勻而又充分的照明,防止雜散(san)光對照像(xiang)系統造成影響或干擾,以免照像(xiang)時在(zai)底片形(xing)成灰霧。

高調整庫勒照明系統的必要部件:視場光闌、可進行合軸調整的聚光鏡系統。
① 選用10×物鏡和10×目鏡;
② 把聚光鏡前端透鏡擺進光路中,孔徑光闌調至適中的位置上(不大不小),再把聚光鏡升到頂的位置上,聚光鏡轉盤調至明視野"J"位置;
③ 把視場光闌調至小(0。1);
④ 載物臺上放上已封片的生物樣品,開亮光源,調焦清晰;
⑤ 視域中會出現一個局部照明的區域或亮斑,這是視場光闌的模糊像,在其中可以清晰地看到樣品的細節;在它之外是較暗的視域,不一定能把樣品的細節看得清楚;
⑥ 把聚光鏡微微地向下調,使視野中的亮斑逐漸收小,慢慢變成一個清晰的多邊形象,這便是視場光闌的清晰像;
⑦ 一般情況下,多邊形象并不在視域中央,需要調整聚光鏡的一對調中螺絲,把視場光闌多邊形的像調至中央位置;
⑧ 逐漸開大視場光闌,使多邊形象成為視域的內接多邊形,進一步核對調中的狀況,如對中不夠理想,繼續微微調對中螺絲;
⑨ 將視場光闌稍為再微微開大一些,使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上,至此,庫勒照明系統調整完畢。庫勒照明系統調整好以后,整個視域照明均勻,拍攝的顯微照片明亮清晰,反差正常。

在日后(hou)使用(yong)過程中應特別注意:

 a。 視(shi)場光闌不可任意(yi)開大,但可隨物鏡倍(bei)數的增大而(er)將(jiang)視(shi)場光闌收小(xiao),隨物鏡倍(bei)數的減小(xiao)而(er)開大;

 b。 聚(ju)光鏡的(de)高低位置不準亂調,否(fou)則會破壞已調整好的(de)庫勒照明系統;

 c。 使用10×以下(xia)物鏡(jing)時要將(jiang)(jiang)聚光鏡(jing)前(qian)端透(tou)鏡(jing)擺出光路(lu)外(wai),使用10×或10×以上物鏡(jing)時要將(jiang)(jiang)前(qian)端透(tou)鏡(jing)擺入光路(lu)中;

 d。 關于物鏡(jing)倍數(shu)(shu)與視(shi)場光(guang)闌大小配合問題,在實際使用過(guo)程中,作為(wei)一(yi)般觀(guan)察不(bu)一(yi)定要(yao)收小或開大視(shi)場光(guang)闌,但作顯微照相時,為(wei)了避免雜散光(guang)線對照相系統的(de)干擾,以便能(neng)拍(pai)攝到(dao)較(jiao)完善的(de)照片(pian),則應在使用每一(yi)個倍數(shu)(shu)的(de)物鏡(jing)時,把(ba)視(shi)場光(guang)闌調節到(dao)正好消(xiao)失于所觀(guan)察的(de)視(shi)域邊上,這是比較(jiao)繁復的(de)工(gong)作,但又(you)非做(zuo)不(bu)可。

較為(wei)簡便的(de)(de)方法是把與各個倍數物鏡相對應的(de)(de)視(shi)場光(guang)闌事先調整好(hao),并作(zuo)好(hao)記(ji)號,以后使用時根據記(ji)號直(zhi)接調至相應的(de)(de)位(wei)置。

(4) 孔(kong)徑光(guang)闌(lan)的正確(que)使用: 
由于聚光鏡(jing)的(de)(de)孔徑光闌可以(yi)影響奧林巴斯(si)顯微鏡(jing)的(de)(de)分辨率(lv),使用(yong)時應掌握(wo)正確的(de)(de)使用(yong)方(fang)法。

過(guo)去由于對孔(kong)(kong)徑光闌(lan)的(de)(de)認識不足,往往把(ba)它(ta)當作是調(diao)節(jie)視野亮度的(de)(de)工具。雖然調(diao)節(jie)孔(kong)(kong)徑光闌(lan)在一(yi)(yi)定程度上可(ke)(ke)以改變視野的(de)(de)亮度,但會直接影(ying)響成像的(de)(de)反差、對比(bi)度及分(fen)辨率,在使(shi)用(yong)過(guo)程中應盡(jin)可(ke)(ke)能避(bi)免。為(wei)了發揮聚(ju)光鏡孔(kong)(kong)徑光闌(lan)的(de)(de)作用(yong),以便在觀察時(shi),尤其在作顯微照相(xiang)時(shi)獲得分(fen)辨率,在每換用(yong)一(yi)(yi)個倍數的(de)(de)物鏡時(shi),在樣品調(diao)焦清晰后,需(xu)要調(diao)節(jie)孔(kong)(kong)徑光闌(lan),使(shi)它(ta)的(de)(de)大小正(zheng)好等于所用(yong)物鏡數值孔(kong)(kong)徑(物鏡孔(kong)(kong)徑像)的(de)(de)2/3。

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